5L nuolatinis srauto termostatinis ultragarso homogenizatorius Sonicator

Ultragarso homogenizatoriaus Sonicator taikymas Streptomyces

K: Kokios yra Streptomyces ultrasonication sąlygos?

A: išankstinis gydymas paprastai yra sukonstruotas kaip bakterinės suspensijos koncentracija. Ultragarso sutrikimas buvo atliekamas naudojant ultragarso ląstelių purkštuvą. Šiuo metu priimtos specialios sąlygos yra tokios:

1. Bakterijų 24 h kultūros terpė buvo centrifuguojama 5 000 r / min 5 min., Kad būtų surinktos ląstelės.

2. 3 kartus nusiplaukite Na2HPO-NaH2PO buferiu, kurio pH yra 7,5, tada sumaišykite bakterijas su 1: 3 suspensija šiuo buferiu. Įdėtas 40 ml dideliu plastikiniu bandiniu.

3. Padėkite didelį plastikinį bandinį ant ledo vonios ir naudokite ultragarsą (galia 200 W, 1/2 "zondas, susmulkinama 30 s, pertraukiama 30 S).

4. Smulkintą skystį centrifugavo dideliu greičiu esant 12 000 r / min 30 minučių, kad surinktų liekamasis liekanas ir supernatantas. Ultragarso sutrikimo procedūra buvo iš esmės tokia pati kaip ir anksčiau, ty plauti ląstelės taip pat gali būti iš anksto atšaldytos fiziologiniu tirpalu arba pH 8 Tris. -HCl, plauti vieną kartą. Be to, ultragarso dozė labai skiriasi nuo mėginio ir bakterijų kiekio. Maitinimas gali siekti 400-600w, viršyti 5s, sustabdyti 5s, ledo vonią ir pridėti PMSF, kurio galutinė koncentracija yra 1 mM. Norint nustatyti tinkamą ultragarsinį intensyvumą ir dažnumą, bet kada reikia stebėti mikroskopinį tyrimą, ar ląstelės yra visiškai pažeistos. Actinomicetai priskiriami gramneigiamų bakterijų genetui, turinčiam didelį (G + C) molinį procentą (mol.%) Prokariotinių sistemų filogenetiniame medyje. Kai atliekamas E. coli ultragarsas, naudojamas 400W ultragarsinis ląstelių purkštuvas, o super 5 stop 5 metodas yra geras, tačiau, atrodo, jis neveikia Streptomyces. Ar tai dėl ląstelių sienelių kompozicijos skirtumų, nes E. coli yra gramneigiama bakterija.

Proudct Photo